食品中細(xì)菌的提取-沙門氏菌的檢測

2021-07-15 09:24:00    admin2508 分享

導(dǎo)語：沙門氏菌病是指由各類型沙門氏菌所引起的對人類、家畜以及野生禽獸不同形式的總稱。沙門氏菌的病原體。屬腸菌科，革蘭氏陰性腸道桿菌。已發(fā)現(xiàn)的近一千種（或菌株）。按其抗原成分，

一、沙門氏菌檢測

沙門氏菌病是指由各類型沙門氏菌所引起的對人類、家畜以及野生禽獸不同形式的總稱。沙門氏菌的病原體。屬腸菌科，革蘭氏陰性腸道桿菌。已發(fā)現(xiàn)的近一千種（或菌株）。按其抗原成分，可分為甲、乙、丙、丁、戊等基本菌組。

實(shí)驗(yàn)過程
1、稱取25g（mL）樣品放入盛放有225mL緩沖蛋白胨水（BPW）的無菌拍打均質(zhì)袋中，用拍打式均質(zhì)器拍打1min-2min。如需調(diào)整pH值，用1mol/L無菌NaOH或HCL調(diào)pH至6.8±0.2
2、使用均質(zhì)袋，可直接進(jìn)行培養(yǎng)于36℃±1℃，培養(yǎng)8h~18h
3、輕輕搖晃培養(yǎng)過的樣品混合物，取1mlL（可使用SOCOREX稀釋移液器），轉(zhuǎn)種于10mL亞硒酸鹽胱氨酸増菌液SC內(nèi)，于36℃±1℃培養(yǎng)18h~24h。同時(shí)取1mL，轉(zhuǎn)種于10mLTTB內(nèi)，于42℃±1℃培養(yǎng)
4、分別用接種環(huán)取增菌液1環(huán)，劃線接種于一個(gè)BS瓊脂平板于36℃±1℃培養(yǎng)40h~48h和一個(gè)HE瓊脂平板于36℃±1℃分別培養(yǎng)18h~24h觀察各個(gè)平板上生長的菌落

各個(gè)平板上生長的菌落
* BS瓊脂 菌落為黑色有金屬光澤、棕褐色 或灰色，菌落周圍培養(yǎng)基可呈黑色或棕色；
* HE瓊脂 藍(lán)綠色或藍(lán)色，多數(shù)菌落中.心黑色或幾乎黑色；有些菌株為黃色，中.心黑色或幾乎全黑色
* XLD 瓊脂 菌落呈粉紅色，或帶不帶黑色中.心，有些菌株可呈現(xiàn)大的帶光澤的黑色中.心，或呈現(xiàn)全.部黑色的菌落；有些菌株為黑色菌落，帶或不帶黑色中.心鑒定  采用的試劑進(jìn)行鑒定。

二、拍打式均質(zhì)器和稀釋移液器

1、wiggens拍打式均質(zhì)器

* 細(xì)菌萃取，經(jīng)過拍打式均質(zhì)后細(xì)菌沒被損壞
* 容易插入均質(zhì)袋, 在均質(zhì)結(jié)束時(shí)，葉片并排?？?。密封系統(tǒng)防止液    體從均質(zhì)袋頂部溢出
* 鋼化玻璃制可視窗，易于觀察（W 型）
* 工作時(shí)間1s-9min59s可調(diào)，或者選擇連續(xù)工作模式免維護(hù)
* 無碳刷電機(jī)
 

2、socorex稀釋移液器

移液器的金屬吸嘴可以安裝細(xì)而長的麥管吸頭，所以該移液器可以從細(xì)長的容器中取樣 ( 如拍打均質(zhì)器的樣品袋 )在細(xì)菌學(xué)的研究中，該移液器經(jīng)常用來替代刻度玻璃移液管進(jìn)行1:10稀釋樣品研究。

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